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液相色谱仪的原理及用途

发布时间:2019-05-20 09:44:55 作者:

       

   通过高压泵将液体储集层中的流动相送入系统,样品溶液通过进样器进入流动相,并将流动相装入色谱柱(固定相)。由于样品溶液中各组分在两相中的分配系数不同,在两相中作相对运动时,经过反复的吸附-解吸分配过程后,各组分的移动速度有很大的差异,并依次从柱中分离出单一组分,通过检测器时,样品浓度被转换成电信号并传送到记录仪,数据以图形的形式打印出来。

主要用于高沸点混合物和难降解化合物的色谱柱核洗脱分离。用于生物化学、生物医药、环境化学、石化等部门。

根据固定相是液体还是固体,液相色谱分为液 - 液色谱(LLC)和液 - 固色谱(LSC)。现代液相色谱仪由高压输液泵、进样系统、温度控制系统、色谱柱、检测器和信号记录系统组成。与传统的液相色谱仪装置相比,具有高效、快速、灵敏的特点。

转向

高效液相色谱法主要包括进样系统、输液系统、分离系统、检测系统和数据处理系统。

进样系统

一般采用膜片式喷油器或高压采样器完成注采作业,注入量不变。这有利于提高分析样品的重复性。

输液系统

该系统由高压泵、流动相储层和梯度仪三部分组成。高压泵的总压为1.47×4.4X10Pa,流量可调且稳定。当高压流动相通过色谱柱时,可以减小样品在色谱柱中的扩散效应,加快色谱柱内的移动速度。这有利于提高样品的分辨率,回收样品,保持样品的生物活性。

分离系统

该系统包括色谱柱、连接喷嘴和恒温器。色谱柱一般为10~50 cm长(必要时可在两者之间加装一根管),内径为2mm和5mm。采用“优质不锈钢或厚壁玻璃管或钛合金”制造。房子内装有固定相,直径5~10μm(由基质和固定液体组成)。

固定相中的基质由具有高机械强度的树脂或硅胶组成,它们是惰性的(例如硅胶表面上的硅酸基因已被除去),孔隙率(孔径高达1000?)和大比表面积,加上表面是机械涂层的(如在气相色谱中制备固定相),或化学偶联到各种基因(如磷酸盐,季铵盐,羟甲基,苯基,氨基或各种长度的碳链) )烷基等)或配体的有机化合物。