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液相色谱仪色谱柱平缓慢解决方法

发布时间:2019-05-30 10:37:21 作者:

 

液相色谱柱平衡缓慢的常见原因是新旧流动相组分的吸附强度差异较大。平衡一个特定的分析或者从一种方法转换到另一种方法需要很长时间。可以考虑特殊的方法,当不使用色谱柱、填充合适的溶剂或流动相、储存密封、不再进行其他分析时,可以将该柱与塔分离。

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1 胺改良剂

胺改性剂,如三乙胺,通常添加到反相或离子对流动相,以减少样品中断裂成分的尾随。浓度为1 mmol/L~10 mmol/L,平衡时间较长。如果开始使用高浓度的胺,可以快速平衡色谱柱

2 离子对试剂

"季胺类"离子相对较慢,以冲洗试剂,例如四丁基过氧化物(TBA)。酸性组分通过流动相为柱体积的50-100倍的柱后保持不变。使用中间乳液的最佳方法是:甲醇-水含100 mmol/L~200 mmol/L缓冲液或盐。显然,为了去除微量的TBA,需要强的流动相,在酸硅酸盐基体上加入缓冲液来竞争TBA,以产生离子交换。

从反相柱上清洗长链阴离子对试剂是非常缓慢的,即使用100%甲醇也不可能完全去除它。阳离子溶液的保留总是漂移的。当使用长链离子对时,最好使用特殊的柱。

3 硅胶柱

使用硅胶柱进行正常相分离时,通常会发生截留突变,或增加或减少。原因是硅胶柱的含水量随流动相的变化而变化。经水处理后,硅胶柱的保留时间大大缩短。

4 四氢呋喃作流动相

在反相流动相中,四氢呋喃(THF)不影响柱平衡。THF的性质类似于甲醇或乙腈,但是对于某些类型的样品,例如水溶性维生素的分离,从含THF的流动相到非THF,以及大约半天时间平衡柱,这也证明了这种作用对其它种类的样品的影响。