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液相色谱仪检测豆制品中大豆异黄酮的方案

发布时间:2019-06-14 10:29:31 作者:

液相色谱仪测定大豆产品中大豆异黄酮的含量

大豆异黄酮是大豆生长过程中形成的次生代谢产物。大豆异黄酮是从植物中提取的,具有与雌激素相似的结构,当大豆异黄酮影响激素分泌、代谢生物活性、蛋白质合成和生长因子活性时,大豆异黄酮是天然的癌症化学预防剂。平时多吃大豆异黄酮有助于抑制前列腺癌细胞的生长。饮食中的大豆异黄酮主要来源于大豆和大豆制品。采用高效液相色谱仪(HPLC)测定了大豆异黄酮的含量。建立了高效液相色谱仪测定大豆异黄酮的方法。

样品制备:

10 g大豆样品称重,用10倍80%乙醇回流1小时,然后超声提取30分钟。上清液用定性滤纸过滤,滤液移入100毫升容量瓶中,用0.32um滤膜的溶剂过滤器过滤。从10ml和离心管中准确提取液样,用水浴氮气风机在50℃浓缩结晶,溶于5ml乙腈-0.2%乙酸溶液中。过滤0.32um膜,移入样品瓶进行高效液相色谱仪分析。

检测仪器:

超高液相色谱仪(紫外检测器,四元数泵,手动采样器),氮气

试剂:甲醇、乙腈(色谱纯度);水:蒸水;以乙醇为分析纯度的样品制备;大豆异黄酮标准品:大豆苷、大豆苷、染料木素、大豆苷、大豆苷、染料木素。

色谱条件:

色谱柱为C18柱(150mm、6mm、5μm),流动相为乙腈溶液和醋酸溶液,流速为0.15mL·min,柱温为200℃,进样体积为5/L·L~(-1)。

采用溶剂过滤器制备样品,保证了样品的纯度,有效地防止了杂质对检测结果的影响。采用水浴式氮气风机将空气与样品溶剂分离,高温加热结晶,更适合于标准样品溶液的配制。采用液相色谱仪测定大豆制品中异黄酮的含量,重现性好,精密度高,回收率高。