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高效液相色谱仪的色谱柱容易出现问题的内在原因

发布时间:2019-06-25 14:15:49 作者:

高效液相色谱仪的色谱柱是高效液相色谱仪的主要组成部分,柱效应直接影响目标化合物的分析和检测。但在高效液相色谱仪分析中,容易出现柱堵塞引起的系统压力高、柱效率低引起的峰尾和变宽、柱污染和破坏造成的虚峰等问题。这些问题的内在原因是硅羟基的死亡吸附、重金属的存在、碳的损失、缓冲溶液中的盐沉淀和液相色谱柱的干燥。

一、硅羟基的死吸附:

由于在液相色谱柱上硅胶颗粒表面存在硅胶羟基,所以样品组分不仅在流动相和固定相之间,而且在流动相和硅羟基之间,也就是说,存在双重分布效应。

二、重金属的存在:

无论硅胶粒子的纯度有多高,无论是怎样处理的,都会以金属氧化物的形式存在于硅胶颗粒表面。这些金属氧化物容易和其它化合物形成螯合物,会导致它们被氧化产生不对称及尾峰。

三、碳流失:

长期使用固定相后,部分碳链会被流动相洗脱,并随流动相流动,造成碳损失。

四、盐在缓冲器中的沉淀:

在高效液相色谱仪分析中,有时流动相含有缓冲盐。在分析后,如果不首先用一定比例的水相洗涤具有一定比例的水相,则有机相比较高,而水相的微环境中的水相较低。此时,流动相的缓冲盐溶液很容易沉淀盐,堵塞了柱体,增加了柱体压力,降低了柱效率。

五、高效液相仪色谱柱变干:

如果高效液相色谱仪的色谱柱未被适当保存,高效液相色谱仪的色谱柱中的所有保存溶液将蒸发,高效液相仪的色谱柱将干燥,这将损坏液相色谱柱并影响分离效果。