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高效液相色谱仪柱温箱的作用

发布时间:2019-07-15 10:42:48 作者:

柱温箱是高效液相色谱仪分析中用来控制液相色谱柱温度的温度控制仪器。能准确、稳定地控制液相色谱柱的稳定性。有利于提高液相色谱柱的灵敏度,提高光谱峰的分辨率,加快分离速度,缩短分析时间,保证分析结果。准确度和再现性。对于高效液相色谱仪而言,柱温的升高可以加快分离过程,但样品的不稳定保留时间会增加检测的难度,分辨率也会降低。相反,当柱温较低时,分离分辨率提高,但分离过程时间较长,因为在低温条件下,流动相粘度的增加会延长检测时间,增加泵的磨损。同时,溶解度的相对降低将导致缓冲盐结晶现象和泵、注入阀、管道和高效液相色谱仪色谱柱的堵塞。杂质被吸附在填料上,不易洗脱,从而影响色谱柱的使用寿命。

一般来说,高效液相色谱仪色谱分析的过程取决于流动相和固定相结合分离的差异,从而实现物质的分离。温度会影响结合分离过程,从而影响高效液相色谱仪色谱分析过程。柱温的变化对分离度和峰形有影响,但对柱的分离程度影响不大。影响柱分离度的因素有:柱型、性质(粒径、粒度分布等)、填充条件、柱长、流动相类型、流速以及决定柱效率的物质性质。

主要结果如下:

(1)色谱柱越长,填料性能越好,组分间的分离效果越好,但色谱柱越长,压降越大,输入压力受到限制。如果高效液相色谱柱长度过长会增加进出口压力比,反之会降低分离度。

(2)柱填料的粒径也是主要因素,颗粒越细,由于表面积的增加,其分辨率效果越好,但微粒会增加柱的压降并起到反应的作用;

(3)柱温对分离效果也有很大的影响,因为气体在液体中的溶解度或固体表面的吸附程度随着温度的升高而降低。在气-液色谱分析中,当温度超过一定温度时,静态液体通常从高效液相色谱仪色谱柱中蒸发,因此在选择高效液相色谱仪色谱柱温度时应考虑样品的沸腾。点。一般情况下,它略低于样品的平均沸点。

(4)载气类型的影响,传统的载气有N2、H2、He、Ar等,其中H2和He气体的分子量小,分析速度快,高浓度的介质容易在两者之间形成扩散,影响分离程度,通常在介质浓度低、流量大、扩散效应减小的地区使用。氮气、氩气等分子量较大的气体具有扩散效应小的优点,但缺点是柱内压降大,流速慢,即分析周期长。

(5)载气速度的影响,介质在固定相上的停留时间主要取决于介质本身的特性(挥发性、极性)和载气的流速。因此,流动速度直接影响分离程度。

(6)注入时间和注入量的影响,注射时间应尽可能短,原则上,瞬时喷射将提高分离程度。采样体积应尽可能小,但探测器应能识别。

因此,可以通过增加塔长、减小进样体积、降低载气流量、降低塔温、提高汽化室温度、减少系统死区来提高塔的分离度。