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土壤分析测试技术,高效液相色谱法与气相色谱法的区别

发布时间:2019-07-20 15:23:39 作者:

高效液相色谱分析法(HPLC),它的基本概念及理论基础(如保留值、塔板理论、速率理论、容量因子、分离度等),与气相色谱是一致的,但又有不同之处:高效液相色谱与气相色谱的主要区别可归结为以下几点。


(1)进样方式的不同,高效液相色谱只要将样品制成溶液,而气相色谱需加热l气化或裂解。

(2)流动相的不同,在被测组分与流动相之间、流动相与固定相之间都存在着一一定的相互作用力。

(3)由于液体的黏度较气体大两个数量级,使被测组分在液体流动相中的扩散l系数比在气体流动相中小4~5个数量级。

(4)由于流动相的化学成分可进行广泛选择,并可配置成二元或多元体系,满足梯度洗脱的需要,因而提高了高效液相色谱仪的分辨率(柱效能)。

(5)高效液相色谱仪采用5~10 Lm细颗粒固定相,使流动相在色谱柱上渗透性大大缩小,流动阻力增大,必须借助高压泵输送流动相。

(6)高效液相色谱仪是在液相中进行,对被测组分的检测,通常采用灵敏的湿法光度检测器,例如,紫外光度检测器、示差折光检测器、荧光光度检测器等。

(7)液相色谱仪与气相色谱相提比较,高效液相色谱提同样具有高灵敏度、高效能和l高速度的特点。

高效液相色谱仪的定性和定量分析,与气相色谱分析相似,在定性分析中,采用保留值定性或与其他定性能力强的仪器分析法连用;在定量分析中,采用测量峰面积的归一化法、内标法或外标法等,但高效液相色谱仪在分离复杂组分式样时,有些组分常不能出峰,因此归一化法定量受到限制,而内标法定量则被广泛使用。

气相色谱不能由色谱图直接给出未知物的定性结果,而必须由已知标准作对照定性。当无纯物质对照时,定性鉴定就很困难,这时需借助质谱、红外和化学法等配合。另外大多数金属盐类和热稳定性差的物质还不能分析。此缺点可由高效液相色谱仪法来克服。在经典液相色谱的基础上,引入了气相色谱的理论与技术,在20世纪70年代初建立了高效液相色谱仪分析法(以HPLC表示)。在常压下操作的液相色谱,分离一个样品往往长达几个小时至几十个小时,因此工作效率很低。人们曾对这种经典液相色谱法试用了柱前加压或柱后减压的办法来提高流速,以缩短分离的时间,但是结果失败了。根据液相色谱理论,因为随着载液(流动相)流速的提高,板高则增大,所以柱效会显著降低。随着生产技术的提高,人们制成了细小(小于10um)而高效的填充物,从而使柱效大大提高。但是随着填充物粒度的减小,柱压降显著增大,为了得到合理的载液流速,使用了高压输液泵,使流速达到l~10 mL/min。从而使分析一个多组分样品只需几分钟到几十分钟时间。随着高效固定相、高压泵和高灵敏度检测器以及电子技术和计算机技术的应用,20世纪70年代以后逐步实现了液相色谱仪分析的高效、高速、高灵敏和自动化操作。因此人们常称它为高效液相色谱仪或现代液相色谱仪,以区别于经典液相色谱。高效液相色谱法的分类与经典液相色谱法一致。按固定相的聚集状态不同分为液固色谱法和液液色谱法。按分离原理不同分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶色谱法四类。