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高效液相色谱仪产生气泡的原因及排除方法

发布时间:2019-08-02 11:12:56 作者:

在高效液相色谱实验中,没有气泡进入系统,影响实验结果,导致杂峰的产生。介绍了高效液相色谱仪产生气泡的原因及消除方法。


1.高效液相色谱仪溶剂混合:高效液相色谱仪溶剂混合时,由于两种液体热力学体积的变化会产生气泡,混合时,容易产生放热或吸热气泡,如:甲醇和水的混合属于放热,乙腈和水的混合属于吸热。通常情况下,混合后体积明显增大或减小,产生许多小气泡,悬挂在瓶子的墙上,或摇动以看到液体中的许多小气泡。故障排除:溶剂过滤、超声波脱气,特别是乙腈与水混合时,超声波脱气时间较长。也可采用安装在线除气器、充氮除气等其他方法进行除气。

2.高效液相色谱仪溶剂过滤头污染:溶剂过滤头污染会导致泵在抽吸过程中吸入不均匀,强制抽吸,产生微小的真空气泡。此时,可以观察到许多很小的气泡分布在入口管壁上,有的停留在管壁上,有的感觉速度小于设定值,压力不稳定。高效液相色谱仪故障排除:先观察现象确认,再排除。用5%-10%稀硝酸浸泡一夜或超声处理数小时,然后用纯净水浸泡一夜或超声波处理,注意水的变化几次,将酸渣洗净,然后采用有机相甲醇浸泡处理或超声波处理。如果上述处理失败,应更换新的溶剂过滤器。

3.高效液相色谱仪的流动相不排气:移动相就位后,没有排气,开始运行泵,容易产生气泡。排除问题:放置移动相后,打开旁路阀,用注射器慢慢吸干液体。在观察到液体进口管没有气泡后,吸10毫升以驱动流道中的空气,拧下旁路阀,然后运行泵,或打开旁通阀,以大流量排出液体。在观察到进液管中没有气泡后,将流道中的空气排出2分钟,拧紧旁路阀,然后运行泵。

4.高效液相色谱仪泵污染:基本上是止回阀或泵头的内部污染。泵头是一个压力变化很大,容易产生气泡的地方。泵头通过负压吸收液体。负压必然导致流动相小气泡长大。当泵室改变正压时,长大的气泡可能不会全部变小,流入后续的液路,气泡会在泵室中积聚,从而影响液体吸收的精度。高效液相色谱仪泵污染故障排除:仔细清除泵头,用甲醇超声清洗,向阀,并将内密封圈和泵头整体清洗干净,用甲醇擦拭柱塞杆。必要时更换高效液相色谱仪的单向阀、密封圈和柱塞杆。


5.注射液产生:进样时将气泡带入,吸样时应排除注射针中的气泡故障:进样前,注意注射针内的空气,注射针垂直向上,用指垫压针,向上推,气泡很容易上升,注射针可以排出。

6.高效液相色谱仪的色谱柱气泡的排除:用纯甲醇在低流速(0.2-0.3ml/min)下长时间清洗反相色谱柱,然后逐渐增加流速至1ml/min,直至色谱柱压力稳定,或者更换色谱柱。

7.高效液相色谱检测仪:流动池是气泡容易积聚的地方,对基线有很大影响。当流动相进入柱内时,压力越来越小,微气泡逐渐长大。当流动池的横截面积较大时,池内气泡容易生长,在无外压的情况下很难收缩到管道内。池体在内径以下流出道路,导致池体的存在,导致基线混乱。故

8.高效液相色谱仪的障排除:在高效液相色谱仪的废液出口加装背压调节器,为循环池提供背压;其次,用手指堵住废液管的液体端,观察泵柱压力上升,松开,同时查看检测器显示屏上吸光度值的变化。如果池中有气泡,则吸光度值将发生显著变化。当手松开时,吸光度值将再次升高。证明池中有气泡,但没有排出。当手指被卡松时,吸光度值基本不变,说明排气气泡成功,基线稳定。