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高效液相色谱仪测茶叶中有效成分的含量

发布时间:2019-08-14 09:40:40 作者:

  高效液相色谱仪(HPLC)是一种以液相为流动相,通过高压输液泵获得较高的流速以提高分离速度的色谱方法,它采用的是一种由非常细颗粒的高效固定相组成的色谱柱进行分离和分析。


  在高效液相色谱仪中,如果采用十八烷基键合相和极性流动相等非极性固定相,将形成反相色谱分离系统。另一方面,它被称为正相色谱分离系统。用于反相色谱系统的流动相成本低,应用范围广.

  中国是茶的故乡,泡茶和喝茶已经有几千年的历史了,有许多著名的产品主要品种有绿茶,红茶,乌龙茶,花茶,白茶和黄茶。茶具有强身健体和治疗疾病的药物的疗效,并且具有丰富的欣赏兴趣,可以陶冶情操。

  茶叶的营养价值和药理作用与其化学成分密切相关,其化学成分有400多种,其中多酚、生物碱和维生素与人体的营养价值和药理作用密切相关。

茶多酚是茶叶中的主要风味物质,具有苦味。茶叶含量相对较高,占干茶物质的18% ~ 36%。它是茶叶药用价值最重要的物质基础,具有降血脂、抗肿瘤、抗脂质过氧化、抗菌抗病毒、调节免疫功能等作用。茶多酚实际上是各种多酚的总称,其中儿茶素最为重要,占茶多酚总量的50%-70%。

  茶叶指纹图谱(Tea fingerprinting)是指利用茶叶内含物的秘密、茶树的遗传密码以及指纹图谱的方式表达不同特征的茶叶,指纹图谱可以包括类型、产地、树龄、特征、成品年份等。本实验采用高效液相色谱仪(HPLC)法分离茶叶的主要成分,为建立茶叶指纹图谱奠定基础。


  在实验过程中可能会引入一些杂质,因此实验后必须对高效液相色谱仪的色谱柱进行清洗。

  三.仪器和试剂

  1.仪器:

hops AP80-16 plus二进制高压高效液相色谱仪

  2.试剂:

(1)甲醇在色谱上是纯的。

(2)乙腈在色谱上是纯的。

(3)甲酸分析纯度。

  四.实验步骤

  1.色谱条件

色谱柱:c18高效液相色谱柱

柱温:室温

流动相:乙腈1%甲酸/%

检测波长:276nm

梯度洗脱:

  2.准备待测溶液

取两种不同的绿茶,分别标记为绿茶1和绿茶2。各取约0.8000克,用50毫升沸水冲泡,分别取10分钟和30分钟的上清液,通过0.45μm的过滤头,得到样品      (冲泡10分钟的绿茶1)、样品2(冲泡30分钟的绿茶1)、样品3(冲泡10分钟的绿茶2)和样品4(冲泡30分钟的绿茶2)。

  4.色谱测定

(1)按照操作程序打开电脑,打开除气器、泵、检测器等的电源启动奥普斯APS80-16PLUS在线工作软件,并设置操作条件。流速为1.00毫升/分钟。

(2)仪器稳定后,开始注射,将进样阀手柄置于“加载”位置,用微量注射器吸取50微升混合溶液,将其注入仪器的进样口,并顺时针转动进样阀至“进样”位置。此时,注射标记显示在显示屏上。

(3)记录高效液相色谱仪图谱各色谱峰的保留时间和峰面积。测试报告将以HTM格式打印,以便直接粘贴到测试报告中。

(4)实验完成后,清洗系统和色谱柱。